El sistema de transción de piggback hace mono sinomolgo transgénico

La ingeniería genética ha sido desafiada por los límites de los métodos de administración de genes basados ​​en virus en primates no humanos. Recientemente, los investigadores en Japón utilizaron con éxito un sistema no vical para introducir un transgen en un transgen para introducir un transgen en los monos Synomolgus.

"Nuestra investigación representa un hito en el campo de la ingeniería genética", Tomoyuki Tsukiama, PhD, profesor asociado en Ingeniería del Desarrollo, Instituto para el Estudio Avanzado de Biología Humana (WPI-Shabi) en Kyoto, Terties y Biología de células STAM en el Instituto. "Nuestro método proporciona una forma práctica y eficiente de introducir transgenes en primates no humanos, que esperamos desbloqueamos una nueva visión de enfermedades humanas complejas".

Se publica en el trabajo Comunicación de la naturaleza En papel "Generaciones no virales de primates transgénicos no humanos a través de sistemas de transción Piggibac.,

Aunque el primet no humano es un modelo esencial para la investigación biomédica, la modificación genética de estos animales ha sido un desafío. Por ejemplo, los métodos tradicionales basados ​​en virus (métodos lentivirales se han utilizado para generar monos transgénicos) requieren características de control especiales y están limitados en el contexto del tamaño de Transgen que puede transportar el virus. Además, estos métodos no permiten la selección precisa del embrión revisado antes de la implantación.

Para superar estos desafíos, el equipo de investigación buscó una opción para usar el virus para transportar transgen, en su lugar, seleccionó un sistema de transción Piggiback sin vehículos. El sistema Piggibac Transposon proporciona varias ventajas sobre los enfoques tradicionales basados ​​en virus, que incluyen más flexibilidad en términos del tamaño de Transgen que se puede hacer y la fase fetal inicial tiene la capacidad de confirmar modificaciones exitosas en la fase fetal inicial. Esto permite una detección fetal más eficiente antes de la implantación, lo que mejora la posibilidad de producir animales genéticamente modificados que llevan los síntomas deseados.

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Después de optimizar el protocolo en ratones, los autores declararon que "los coinserts de los componentes de Piggiback con ovocitos de la etapa de esperma II con éxito (generados) expresan monos transgénicos transgénicos en todo el cuerpo". La expresión de transgen, dicen, se observaron en todos los tipos de tejidos examinados, incluidas las células germinales, aunque el nivel de expresión varía.

Más especialmente, en los monos Cynomolgus resultantes, hubo una amplia expresión de los genes reporteros fluorescentes. La proteína fluorescente roja se localizó en la membrana celular, y la proteína fluorescente verde se localizó en el núcleo celular. La expresión se confirmó en todos los tejidos examinados, incluidas las células germinales, lo que demuestra que el transi se introdujo estrictamente. Estos hallazgos sugieren que el sistema de transposición de Piggiback tiene una capacidad importante para generar primates genéticamente modificados, que pueden usarse para estudiar enfermedades humanas que no pueden repetir el modelo de roedores tradicional.

Si bien el patrón de integración transi fue consistente entre varios tejidos, hubo una variación en el nivel de expresión. Esta variabilidad subraya el requisito en futuras aplicaciones para elegir cuidadosamente los promotores en función del tejido objetivo. Por ejemplo, los genes como Oct3/4 y DDX4 juegan un papel importante en la discriminación de la dinastía celular alemana, mientras que Syn1 y Thy1 están involucrados en la discriminación de la dinastía neuronal. Al seleccionar promotores adecuados para tejidos específicos, los investigadores pueden fijar la expresión génica para lograr los efectos deseados, un paso esencial para avanzar en los modelos genéticos para la investigación de enfermedades.

El equipo ha planeado expandir las aplicaciones de este sistema para incluir la expresión génica multiplex y el control transi preciso, permitiendo modelos genéticos más sofisticados. Además, los investigadores están descubriendo la capacidad de integrar datos epignéticos cómo los genes se convierten en su trabajo y comprenden mejor cómo la expresión génica se regula a nivel molecular. Al refinar estas técnicas, los investigadores tienen como objetivo detectar mecanismos de enfermedades que sigan siendo inaccesibles en los modelos de roedores y, finalmente, mejorar nuestra comprensión de las condiciones de salud complejas en los humanos.